2024 10-06 非肿瘤之scRNA-seq和bulk RNA结合思路 近些年,单细胞思路是生信研究热点,非肿瘤的单细胞数据相对较少,因此巧妙地运用单细胞数据,是提高文章质量的关键。今天分享一篇非肿瘤相关的纯生信文章,将Single-cell和Bulk RNA数据相结合,用常规的分析方法,发表在Frontiers in Immunology上,一起来看看吧。阿尔兹海默症免疫相关基因的表达和潜在调控机制开始这篇文章之前,我们先回顾一下单细胞RNA测序和Bulk RN..... 阅 读 全 部 >
2024 09-02 patch-seq结合单细胞电生理学与单细胞转录组学 Patch-seq是一种结合了膜片钳记录技术(patch-clamp electrophysiology)、单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing)和形态学分析的新兴技术。这种方法能够在同一个细胞中同时获得电生理特性、基因表达数据和形态学特征。2020年在细胞代谢期刊上发表了题为《Patch-Seq Links Single-Cell T...阅读全文>&... 阅 读 全 部 >
2024 08-21 高通量测序原始数据上传教程 必备软件Aspera 插件 下载网址 : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Traces/sra_sub/sub.cgi“每个过程对应的网址:NCBI注册 网址:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/account/申请BioProject 网址:https://submit.ncbi.nlm.nih.gov/subs...阅读全文>>... 阅 读 全 部 >
2024 08-20 不看后悔!GEO数据库10X单细胞测序原始测序测序数据(fastq)下载指南来啦 每年的1-3月份是很多老师撰写国自然本子的主要时期,但是每年这个时期都会有老师因为各种各样的原因,导致实验计划延迟而拿不到需要的实验数据,因此需要借助数据库已有的数据做数据分析为基金申请做理论支撑。另外由于很多突发的因素产生,科研人员往往无法及时开展实验工作,因此更需要借助数据库数据,这在今年的新冠肺炎疫情中体现特别明显,在疫情发生的早期,就陆续发表了多篇研究论文,分析讨论新冠肺炎病毒靶向蛋白血管... 阅 读 全 部 >
2024 08-19 高通量测序数据上传指南 引很多老师在写文章的时候,精力通常会放在文章中的技术或者实验细节,而疏忽原始数据上传的工作。文章准备接收时,审稿人需要老师提供文章中使用数据的登录号,一般时间要求较紧,对于没接触过数据上传的老师来说,可能会成为文章接收最后的绊脚石,为此我们撰写了一份高通量测序数据上传指南,可以让老师快速掌握数据上传的技能,助力老师文章发表。目前高通量测序原始数据通常上传到NCBI的SRA(The ...阅读全文&... 阅 读 全 部 >
2023 12-31 10x Genomics FFPE样本单细胞转录组+空间转录组解决方案 FFPE(formalin fixation and paraffin embedding)样本,即福尔马林固定石蜡包埋的组织样本。它承载了众多疾病的关键信息,又可长期室温保存,所以是病理科当之无愧的“瑰宝”。在世界范围内,大约有数十亿份组织样品存储在医院或生物样本库中,其中绝大多数是FFPE样本。但是,FFPE样本也因为福尔马林的固定容易使组织中的核酸发生不同程度的降解和分子间...阅读全文&g... 阅 读 全 部 >
2023 12-19 FFPE样本的空间转录组是怎么做的? 上期我们介绍了空间转录组冰冻组织样本的制备,那么这期就来聊一聊空间转录组FFPE样本的那些事儿。FFPE样本常用于储存临床上的病理组织,是珍贵的医学研究材料,但由于FFPE样本固定时福尔马林的使用和保存时间久等原因,导致核酸存在不同程度的降解,使得研究基因表达颇为棘手。10x Genomics经过探索推出了Visium FFPE空间基因表达解决方案,不仅突破了这个障碍,能从 FFPE 样本...阅... 阅 读 全 部 >
2023 12-17 小白课堂 | 挑战不可能,FFPE样本该如何进行单细胞测序? 福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本自诞生以来,凭借着保存时间长、可关联临床及多组学数据等诸多优点,是生物技术研究、药物发现和回顾性基因研究的宝贵资源。不过令人遗憾的是,FFPE样本目前在单细胞研究中的使用却非常少,组学检测项目也相当有限,究其原因是FFPE处理使得样本中的RNA质量下降且存在片段化,所以难以准确评估转录本的表达。为突破这一壁垒,10x Genomics 经过不断优化...阅读全文... 阅 读 全 部 >
2023 12-16 用证据说话——实测FFPE样本进行单细胞测序狠好使! 福尔马林固定石蜡包埋(Formalin Fixed Paraffin Embedded,FFPE)样本是临床上长期保存病理样本的常用方法,其可以和有价值的临床数据(如患者临床资料,患者生存预后信息,用药和治疗疗效等)相关联,为确定疾病的发生发展机制研究、生物标志物和药物靶标提供了巨大的资源 ,是进行回顾性研究的不二之选。但这种FFPE处理方式会使组织中的核酸发生不同程度的降解,在过去由于技术...... 阅 读 全 部 >
2023 07-28 TRIzol裂解的细胞能做Ribo-seq吗 | 翻译组 这段时间许多童鞋在后台问,TRIzol裂解的细胞能做翻译组测序(Ribo-seq)吗?今天统一回复下。图 (A)核糖体保护mRNA足迹不被消化;(B)将足迹与基因组比对,可以显示出哪些mRNA正在翻译以及翻译水平高低上图是Ribo-seq简化的实验流程图。Ribo-seq实验是这样做的:快速收获细胞并裂解,保持体内核糖体结合mRNA的位置。然后用RNase I对细胞裂解液进行消化处理(Nucl..... 阅 读 全 部 >