2023 04-15 天呐!双荧光素酶这个实验系统也太强大了吧! 想验证miRNA和靶基因的靶向互作?想知道转录因子与启动子的调控机制?想研究启动子的结构?想分析转录因子的转录激活……这些统统可以用双荧光素酶报告基因检测实验来实现,是不是很强大!那么如此强大的实验你了解多少呢?这么多的应用你会不会一脸懵呢?双荧光素酶报告基因到底是个啥“玩意儿”可以进行做这么多的实验?这些问题想要找到答案就跟着小远的文章往下看吧!原理简介荧光素酶(Luc...阅读全文>&g... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 一文教你荧光素酶实验的应用 荧光素酶因为具有灵敏度高、检测快速、方便等特点而被广泛开发应用。萤光素酶是理想的报告基因,哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,且其一转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。荧光素酶(Luciferase)报告系统是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中...阅读全文&... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 双荧光素酶报告基因实验技术详解 背景介绍荧光素酶(Luciferase)生物检测技术诞生于1990年,距今已有30多年的发展史,1993年第一个萤光素酶专利获批,1996年双萤光素酶报告基因检测系统推出,为研究者的实验提供了更加可靠的工具,成为萤光素酶技术历史上的里程碑事件。荧光素酶是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界...阅读全文>&g... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 启动子—高效基因表达的钥匙,别选错了!!! 确保外源基因在细胞或者动物体内,持续和高水平的表达具有广泛的应用需求及科研价值。当前递送外源基因的生物学手段,主要是运用质粒或者病毒作为媒介表达基因,而启动子是实现基因表达的基础元件。但是,经常有老师反馈,为什么基因表达不强呢?为什么细胞传代几次之后就不表达了呢?今天,小编带您盘点下,常用的组成型启动子表达效率与细胞的关系。启动子是位于结构基因上游的一段可以行使转录起始功能的序列,...阅读全文&... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 【干货】启动子研究方法高质量总结 01 启动子的基本类型启动子是基因的重要组成部分,其主要功能为调控基因表达(转录)的起始时间和表达程度。但启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录因子的结合来控制基因活动。根据启动子对转录水平的调控程度,将其分为弱启动子和强启动子;此外,参照转录模式,其又可被分为:(1)组成型启动子(Constitutive promoter),能够调控基因表达,使其基本恒定在一定程度上,从而使...阅读全文&... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 解读神秘的eRNA 在发育和分化过程中基因的表达涉及许多顺式调控DNA元件和反式作用蛋白的复杂机制的调控。调节基因转录的顺式调控DNA元件是启动子,绝缘子,增强子和沉默子。最近,一类被称为增强子RNA(eRNA)的增强子转录的ncRNA被发现,eRNA的长度为0.5-5kb,因此可以分类为lncRNA。启动子是基因近端调控DNA元件,包括基础启动子元件。 基础启动子与一般转录因子相关联,招募和定位RN...阅读全文&... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 临床外显子组测序分析中的那些坑 大规模并行测序技术或下一代测序已成为基因诊断和研究的标准技术,尤其是外显子组和基因组测序现在已经在世界范围内广泛应用于患者的分子诊断。在过去几年中,许多实验室都在努力应对基于全新技术建立基因检测工作流程的挑战。测序技术中持续引入新的仪器、化学和分析方法加剧了这些挑战。在过去十年中,新的测序技术已经上市,而其他技术已经消失,并且所有这些技术都经历了快速的变化和升级。外显子组捕获试剂盒、配套设备和耗材... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 临床外显子组测序分析中的那些坑 大规模并行测序技术或下一代测序已成为基因诊断和研究的标准技术,尤其是外显子组和基因组测序现在已经在世界范围内广泛应用于患者的分子诊断。在过去几年中,许多实验室都在努力应对基于全新技术建立基因检测工作流程的挑战。测序技术中持续引入新的仪器、化学和分析方法加剧了这些挑战。在过去十年中,新的测序技术已经上市,而其他技术已经消失,并且所有这些技术都经历了快速的变化和升级。外显子组捕获试剂盒、配套设备和耗材... 阅 读 全 部 >
2023 04-14 Cell | “千人基因组计划”资源扩展——高覆盖全基因组测序和改进的分析方法发现更多基因变异 千人基因组计划(1kGP)的开放获取资源主要基于来自世界五个大陆26个人群2504名个体的低覆盖全基因组测序(WGS)数据。这是第一个大型规模WGS数据集,提供了较为全面的人类遗传变异目录。1kGP数据集包括8470万个单核苷酸变异(SNV),360万个短片段插入和删除(INDEL),以及68818个独立的结构变异(SV)。迄今为止,1kGP资源已被引用超过18000次,并已被用于基因型(GT..... 阅 读 全 部 >
2023 04-14 Nature | 迄今为止最大规模GWAS研究绘制身高基因图谱,揭示1.2万个与人类身高相关的SNP 在婴儿成长为成人过程中,遗传因素起到了重要作用,这一直是人类生物学中一个复杂而又鲜为人知的领域。自2007年以来,全基因组关联研究(GWAS)已经确定了常见单核苷酸多态性(SNP)与身高之间的数千种关联。此前最大规模的、有关身高的GWAS纳入了多达70万个体的样本量,并报告了712个位点的3,290个独立关联。但这些遗传数据大部分来自欧洲血统人群,得出的结果无法涵盖到全球范围。在欧洲血统以外的人群... 阅 读 全 部 >