2023 04-15 天呐!双荧光素酶这个实验系统也太强大了吧! 想验证miRNA和靶基因的靶向互作?想知道转录因子与启动子的调控机制?想研究启动子的结构?想分析转录因子的转录激活……这些统统可以用双荧光素酶报告基因检测实验来实现,是不是很强大!那么如此强大的实验你了解多少呢?这么多的应用你会不会一脸懵呢?双荧光素酶报告基因到底是个啥“玩意儿”可以进行做这么多的实验?这些问题想要找到答案就跟着小远的文章往下看吧!原理简介荧光素酶(Luc...阅读全文>&g... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 一文教你荧光素酶实验的应用 荧光素酶因为具有灵敏度高、检测快速、方便等特点而被广泛开发应用。萤光素酶是理想的报告基因,哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,且其一转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。荧光素酶(Luciferase)报告系统是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中...阅读全文&... 阅 读 全 部 >
2023 04-15 双荧光素酶报告基因实验技术详解 背景介绍荧光素酶(Luciferase)生物检测技术诞生于1990年,距今已有30多年的发展史,1993年第一个萤光素酶专利获批,1996年双萤光素酶报告基因检测系统推出,为研究者的实验提供了更加可靠的工具,成为萤光素酶技术历史上的里程碑事件。荧光素酶是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界...阅读全文>&g... 阅 读 全 部 >
2022 10-01 双荧光素酶实验 一、实验原理利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特性,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游, 构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。同时,为了减少内在的变化因素,比如:培养细胞的数目、细胞转染和裂解的效率等对实验准确..... 阅 读 全 部 >